一般來(lái)說(shuō)細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法主要包括:電穿孔法、顯微注射、基因槍、磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、多種陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)、病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染等。其中脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法較為常見(jiàn),接下來(lái)為大家介紹一下脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法的原理和操作步驟。
脂質(zhì)體作為體內(nèi)和體外輸送載體的工具,已經(jīng)研究的十分廣泛,用合成的陽(yáng)離子脂類包裹 DNA,同樣可以通過(guò)融合而進(jìn)入細(xì)胞。使用脂質(zhì)體將 DNA 帶入不同類型的真核細(xì)胞,與其它方法相比,有較高的效率和較好的重復(fù)性。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹 DNA,借助脂質(zhì)膜將 DNA 導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體,DNA 并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負(fù)電的 DNA 自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成 DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物,從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。
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